响应面法芒果工艺浸提优化叶多一酚的

芒果叶为漆树科植物芒果（MangiferaindicaL）的面法芒果树叶，含有芒果苷、优化叶多异芒果苷、浸提金丝桃苷、工艺槲皮素、面法芒果没食子酸、优化叶多原儿茶酸等大量多酚类化合物，浸提在抗氧化、工艺抗菌、面法芒果镇痛、优化叶多防晒等方面作用显著，浸提有疏风止咳、工艺防晕止吐、面法芒果降低胆固醇、优化叶多美容美颜、浸提治疗皮肤瘙痒、消积化食等效果。芒果叶资源十分丰富，但是利用率低，在食品、医药领域有很大的开发应用价值。其中多酚的提取方法主要有微波提取和超声提取等方法，工艺优化多采用正交实验，虽然这些提取方法效率较高，工艺优化相对简单，但是由于多酚类遇热易氧化失去活性，正交试验不能给出模型参数和实验预测值。因此本实验采用浸提法，以单因素试验和响应面法优选芒果叶多酚的最佳提取工艺，为综合开发利用芒果叶提供参考。

一、仪器与实验材料

1、仪器

UV-762型紫外可见分光光度计（上海佑科仪器仪表有限公司）；FA1004B电子精密天平（上海越平科学仪器有限公司）；DZF-6020型真空干燥箱（上海琅轩实验设备有限公司）；DZKW-D-2型智能数显恒温水浴箱（北京市永光明医疗仪器厂）；RE-52旋转蒸发仪（上海亚荣生物仪器厂）；SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）。

2、实验材料

焦性没食子酸对照品（质量分数≥99%，成都埃法生物科技有限公司）；芒果叶（采自广西南宁，经西安医学院药学院关丽博士鉴定为漆树科植物芒果MangiferaindicaL的树叶）；水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

二、结果与分析

1、多酚标准曲线的绘制

精密称取焦性没食子酸对照品10.50mg于100mL容量瓶，加50%乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，即为对照品储备溶液（0.1050mg/mL）。精密吸取5mL对照品溶液于25mL容量瓶中，加入4mL蒸馏水和5mL酒石酸亚铁溶液，用pH7.5的NaH₂PO₄-NaHPO₄缓冲溶液定容至刻度，室温静置5min后紫外可见光谱扫描，最大吸收波长为540nm。

精密吸取对照品储备溶液0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0mL于25mL量瓶，分别加入4mL蒸馏水和5mL酒石酸亚铁溶液，用pH7.5的NaH，PO₄-Na₂HPO₄缓冲溶液定容至刻度，配制成0.0126、0.0168、0.0210、0.0252、0.0294、0.03361、0.0378mg/mL系列标准溶液，以试剂空白作对照，540nm测定吸光度。以焦性没食子酸浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标进行线性回归，得回归方程为A=19.481C-0.0134，r=0.9998，在0.0126～0.0378mg/mL范围内焦性没食子酸浓度与吸光度呈良好的线性关系。

2、多酚含量测定，

将芒果叶洗净晾干研磨成粗粉，装入索氏提取器中，加入石油醚连续回流脱色至回流液近无色，将脱色后的芒果叶粗粉晾干备用。取上述芒果叶粗粉按实验条件浸提后抽滤，滤液稀释至适宜浓度，依照标准曲线绘制方法显色后测定吸光度，代入回归方程中计算样品中多酚含量。

3、单因素试验

（1）浸提时间对多酚含量的影响

精密称取1.00g脱色后的芒果叶粗粉5份，在乙醇浓度为60%，料液比1:20，60℃的条件下分别浸提0.5、1、1.5.2、2.5h，将芒果叶洗净晾干研磨成粗粉，装入索氏提取器中，加入石油醚连续回流脱色至回流液近无色，将脱色后的芒果叶粗粉晾干备用。取上述芒果叶粗粉按实验条件浸提后抽滤，滤液稀释至适宜浓度，依照标准曲线绘制方法显色后测定吸光度，代入回归方程中计算样品中多酚含量。测定芒果叶中多酚的含量，浸提时间与多酚含量的关系见图1。

由图1可见随着浸提时间的增加，多酚含量先增加而后降低，当浸提时间为1.5h时，多酚含量达到最大值，因此选取1.5h为宜。

（2）料液比对多酚含量的影响

精密称取1.00g脱色后的芒果叶粗粉5份，在料液比分别为1:10、1:20、1:30、1:40、1:50，乙醇浓度为60%，60℃的条件下分别浸提1.5h，按照2.2方法测定芒果叶中多酚的含量，料液比与多酚含量的关系见图2。由图2可见芒果叶中多酚的含量随着料液比的增大先增大后减小，可能是因为随着溶剂用量增加，多酚溶解度增大，但溶剂量过大又会减弱体系的传质和传热，不利于提取。在料液比为1:30时，多酚含量达到最大，因此选取料液比1:30浸提。

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